基因轉殖魚

核心利用 Tol2-Gateway 系統建立基因轉殖魚模型。此技術結合了 Tol2 轉座子和 Gateway 重組技術，提供快速、模組化的基因轉殖方法。

Tol2-Gateway 系統簡介：
Tol2 是一種來自青鱂魚（Oryzias latipes）的轉座子，能夠在脊椎動物細胞中有效地在基因組中插入特定 DNA 片段。Gateway 技術則利用特定的重組酶，允許研究人員快速且準確地組裝多個 DNA 片段。結合這兩種技術，研究人員可以快速地構建包含啟動子、目標基因和標記基因的轉殖載體，並透過 Tol2 系統將其快速地插入至斑馬魚基因組中。

技術流程：

1. 設計並構建包含目標基因的 Gateway 進入載體（Entry Vectors），例如 p5E（啟動子）、pME（編碼序列）和 p3E（3' UTR）。
2. 透過 LR 重組反應，將上述進入載體與 Tol2 目的載體（Destination Vector）組合，形成最終的轉殖載體。
3. 將轉殖載體與 Tol2 轉座酶 mRNA 共同注射至一細胞期的斑馬魚胚胎。
4. 培育胚胎至適當階段，進行基因型分析以確認轉基因的表達。
5. 建立穩定的轉基因品系，用於後續研究。

此系統的優點包括高效率的基因整合、模組化的載體設計，以及在多種脊椎動物中的廣泛應用性。核心已成功應用 Tol2-Gateway 系統建立多種基因轉殖斑馬魚模型，並持續優化技術以提高效率。