核心利用 CRISPR-Cas9 系統建立基因敲除魚模型。此技術可用於研究基因功能、疾病機制及藥物篩選等。我們提供兩種基因敲除策略：
- 單一靶點敲除（Single Target Site Knockout）此方法透過設計單一導引 RNA（sgRNA）引導 Cas9 蛋白在目標基因特定位點產生雙股 DNA 斷裂，誘導非同源性末端連接（NHEJ）修復，導致插入或刪除（indel）突變，進而破壞基因功能。此策略之優點是技術成熟，可獲得多種不同indel突變，缺點是所產生的突變較容易發生無明顯表現型。
- 大片段刪除（Large Fragment Deletion）此策略設計兩個 sgRNA，分別針對目標基因的兩個位點，使 Cas9 在兩處產生雙股 DNA 斷裂，導致中間大片段的刪除。此方法適用於移除特定功能區域或整個基因。此策略雖可以移除整段基因片段，但依據移除片段大小，其成公執行困難度亦隨之提升。
技術流程：
- 設計並合成目標基因的crRNA或sgRNA。
- 將 crRNA或sgRNA 與 Cas9 mRNA 或蛋白質共同注射至一細胞期的斑馬魚胚胎。
- 培育胚胎至適當階段，進行基因型分析以確認突變。
- 建立穩定的突變品系，用於後續研究。
